Fluo-4 AM，绿色荧光钙离子指示剂 (Fluo-4 AM, green fluorescent calcium indicator)
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Fluo-4 AM 是一种细胞可渗透的 Ca²⁺ 指示剂，经细胞内酯酶代谢后，在 Ca²⁺ 结合时会产生强烈的绿色荧光（激发/发射波长 λ = 494/506 nm）。该染料用于可视化和测量细胞内钙离子浓度，非常适合于显微镜观察、流式细胞仪分析、荧光分光光度法以及高通量荧光微孔板筛选实验等。
Fluo-4 AM 在结构和光谱特性上与常用的 Ca²⁺ 指示剂 Fluo-3 类似，但具有多个优势，如更高的荧光亮度、更快的细胞渗透速度，以及在缓冲液中对 Ca²⁺ 的解离常数（Kd）为 345 nM。由于其荧光发射更强，Fluo-4 AM 可在较低的细胞内浓度下使用，从而减少对活细胞的毒性。
由于Fluo-4 AM不与细胞组分发生共价结合，它可能被有机阴离子转运蛋白主动排出细胞。使用Fluo-4 AM进行体内细胞成像通常在加载后1-2小时内完成，但如有需要可重新向细胞加载染料。为了确定该染料的细胞定位，可使用EDC/EDAC将Fluo-4 AM在原位(in situ) 固定，并使用anti-BAPTA antibodies进行免疫化学复染[2]。
Fluo-4 AM 在水中的溶解度较低，建议先使用标记级 DMSO 配制 1 mM 储备液，再进行细胞染色。推荐的终浓度为 1–5 μM，并在 37 °C 培养 15–60 分钟作为实验起始条件。
[1] Cell Calcium. 2000. 27(2). 97-106. [2] Cell Calcium. 1997. 21(3). 175-183.
染色示例
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| 外观: | 橙红色粉末 |
| 分子量: | 1096.95 |
| CAS 编号: | 273221-67-3 |
| 分子式: | C51H50F2N2O23 |
| IUPAC 名称: | N-[4-[6-[(Acetyloxy)methoxy]-2,7-difluoro-3-oxo-3H-xanthen-9-yl]-2-[2-[2-[bis[2-[(acetyloxy)methoxy]-2-oxoethyl]amino]-5-methylphenoxy]ethoxy]phenyl]-N-[2-[(acetyloxy)methoxy]-2-oxoethyl]glycine (acetyloxy)methyl ester |
| 溶解度: | 在DMSO中效果良好 |
| 质量控制: | NMR 1H and HPLC-MS (95+%) |
| 储存条件: | 收到后可在-20℃黑暗条件下保存24个月。运输：室温下可保存长达3周。干燥保存。 |
| 安全数据表（MSDS）: | 下载 |
| 产品规格 |
| 激发/吸收极大值，纳米: | 494 |
| 发射极大值，纳米: | 518 |
产品引用
- Turchaninova, E.; Robustova, S.; Kovalenko, S.; Dzhabrailov, V.; Dolgodvorova, A.; Romanova, S.; Zybin, D.; Popov, M.; Miftakhova, A.; Frolova, S.; Slotvitsky, M.; Romanov, A.; Agladze, K.; Tsvelaya, V. Refining Fibroblast-to-Cardiomyocyte Transdifferentiation Protocols to Explore Emergent Self- Organization in Cardiac Cultures. Research Square, 2025, preprint. doi: 10.21203/rs.3.rs-7186257/v1
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